REGJISTRI I OBJEKTEVE TE PRONESISE INDUSTRIALE

Lloji i Aplikimit
EPO patents
Nënlloji i Aplikimit
EPO Patent
(10) Numri dhe Data e Regjistrimit
8506 2019.10.04
Status
Regjistruar
(180) Data e mbarimit të afatit
2031.07.29
(20) Numri dhe Data e Depozitimit
AL/P/2019/417 2019.06.11
(40) Numri dhe Data e Publikimit
2019.11.11
(86) Data dhe Numri Ndërkombëtar i Depozitimit
11741727.9 2011.07.29
Status
Regjistruar
Data dhe Numri Ndërkombëtar i Publikimit
EP2598172 2019.03.27
(30) Detajet e Prioritetit
Kodi ID e prioritetit
US 369186
(51) Klasat e KNP-së (IPC)
(SQ)  61; 61
(71/73) Aplikanti
Aplikanti Adresa
Takeda Pharmaceutical Company Limited 1-1, Doshomachi 4-chome, Chuo-ku, Osaka-shi, Osaka, JP
(72) Shpikës
Emri Adresa
IVENS, Andreas Bergellerstrasse 32 , CH-8049 Zurich , CH
TURECEK, Peter WeidlingHauptstrasse 59g , A-3400 Klosterneuburg , AT
ROTTENSTEINER, Hanspeter Haidgasse 10/17 , A-1020 Vienna , AT
ZOECHLING, Oliver Panikengasse 12/1/4 , A-1160 Vienna , AT
HAIDER, Stefan Mozartstrasse 2 , A-3385 Prinzersdorf , AT
SIEKMANN, Juergen Gerasdorfer Strasse 153/209 , A-1210 Vienna , AT
(74) Emri i Përfaqësuesit
Emri Adresa
Krenar LOLOÇI Rr. Ibrahim Rugova, P.1/1, Kati II, Tiranë, Shqipëri (Albania) , AL
Krenar LOLOÇI Rr. Ibrahim Rugova, P.1/1, Kati II, Tiranë, Shqipëri (Albania) , AL
(54) Titull
KATALISTËT NUKLEOFILIK PËR LIDHJEN OKSIMË
(57) Abstrakt
(58) Pretendime
Pretendim Përshkrim
1 1. Një metodë e konjugimit të një polimeri të tretshëm në ujë me një pjesë të karbohidratit të oksiduar të një proteine terapeutike që përfshin kontaktimin e pjesës së karbohidratit të oksiduar me një polimer të tretshëm në ujë të aktivizuar nën kushtet që lejojnë konjugimin; polimeri i tretshëm në ujë i sipërpërmendur që përmban një grup aktiv aminooksi dhe është zgjedhur nga grupi i përbërë prej polietilen glikol (PEG), PEG e degëzuar, PoliPEG® (Polimerët e Efektit Warwick; Coventry, UK), acid polisialik (PSA), polisakarid, pullulan, kitosan, acid hialuronik, sulfat kondroitin, dermatan sulfat, dekstran, karboksimetildekstran, oksid polialkilen (PAO), polialkilen glikol (PAG), polipropilen glikol (PPG), polioksazolin, poliakriloilmorfolin, alkool polivinil (PVA), polikarboksilat, polivinilpirolidon, polifosfazen, polioksazolin, polietilen-co-maleik acid anhidrid, polistiren-co-maleik acid anhidrid, dhe poli(1-hidroksimetiletilen hidroksimetilformal) (PHF); dhe pjesa e karbohidratit të oksiduar të sipërpërmendur nga inkubimi me një zbutës që përfshin një agjent oksidues të zgjedhur nga grupi i përbërë prej periodat natriumi (NaIO4), tetraacetat plumbi (Pb(OAc)4) dhe perutenat kaliumi (KRuO4); ku një lidhje oksimë është formuar ndërmjet pjesës së karbohidratit të oksiduar dhe një grupi aktiv aminoksi në polimerin e tretshëm në ujë; dhe ku formimi i lidhjes oksimë të sipërpërmendur është katalizuar nga katalisti nukleofilik m-toluidin.
2 2. Metoda e pretendimit 1 ku proteina terapeutike e sipërpërmendur është zgjedhur nga grupi i përbërë prej Faktorit IX (FIX), Faktorit VIII (FVIII), Faktorit VIIa (FVIIa), Faktorit Von Willebrand (VWF), Faktorit V (FV), Faktorit X (FX), Faktorit XI (FXI), Faktorit XII (FXII), trombinës (FII), proteinës C, proteinës S, tPA, PAI-1, faktorit ind (TF),ADAMTS 13 proteazë, IL-1 alfa, IL-1 beta, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-11, faktorit-1të stimulimit të kolonisë (CSF-1), M-CSF, SCF, GM-CSF, faktorit të stimulimit të kolonisë së granulociteve (G-CSF), EPO, interferon-alfa (IFN-alfa), konsensus interferon, IFN-beta, IFN-gama, IFN-omega, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-31, IL-32 alfa, IL-33, trombopoietin (TPO), Ang-1, Ang-2, Ang-4, Ang-Y, polipeptid angiopoietin-ngjashëm 1 (ANGPTL1), polipeptid angiopoietinlik 2 (ANGPTL2), polipeptid angiopoietin-ngjashëm 3 (ANGPTL3), polipeptid angiopoietin-ngjashëm 4 (ANGPTL4), polipeptid angiopoietin-ngjashëm 5 (ANGPTL5), polipeptid angiopoietin-ngjashëm 6 (ANGPTL6), angiopoietinlike polipeptide 7 (ANGPTL7), vitronektin, faktorit të rritjes vaskulare endoteliale(VEGF), angiogenin, aktivin A, aktivin B, aktivin C, proteina morfogjenike e kockës-1, proteina morfogjenike e kockës-2, proteina morfogjenike e kockës-3, proteina morfogjenike e kockës-4, proteina morfogjenike e kockës-5, proteina morfogjenike e kockës-6, proteina morfogjenike e kockës-7, proteina morfogjenike e kockës-8, proteina morfogjenike e kockës-9, proteina morfogjenike e kockës-10, proteina morfogjenike e kockës-11, proteina morfogjenike e kockës-12, proteina morfogjenike e kockës-13, proteina morfogjenike e kockës-14, proteina morfogjenike e kockës-15, receptori i proteinës morfogjenike të kockës IA, receptori i proteinës morfogjenike të kockës IB, receptori i proteinës morfogjenike të kockës II, faktorit neurotrofik të derivuar nga truri, kardiotrofin-1, faktorit ciliar neurofilik, receptori i faktorit ciliar neurofilik, kripto, kriptik, faktorit 1 neutrofil kemotaktik i induktuar nga citokina, faktorit 2α neutrofil kemotaktik i induktuar nga citokina, faktorit 2β neutrofil kemotaktik i induktuar nga citokina, faktorit β të rritjes të qelizës endoteliale, endotelin 1, faktorit të rritjes epidermale, epigjen, epiregulin, atraktant neutrofil i derivuar nga epiteliali, faktorit 4 të rritjes së fibroblastit, faktorit 5 të rritjes së fibroblastit, faktorit 6 të rritjes së fibroblastit, faktorit 7 të rritjes së fibroblastit, faktorit 8 të rritjes së fibroblastit, faktorit 8b të rritjes së fibroblastit, faktorit 8c të rritjes së fibroblastit, faktorit 9 të rritjes së fibroblastit, faktorit 10 të rritjes së fibroblastit, faktorit 11 të rritjes së fibroblastit, faktorit 12 të rritjes së fibroblastit, faktorit 13 të rritjes së fibroblastit, faktorit 16 të rritjes së fibroblastit, faktorit 17 të rritjes së fibroblastit, faktorit 19 të rritjes së fibroblastit, faktorit 20 të rritjes së fibroblastit, faktorit 21 të rritjes së fibroblastit, faktorit acidik të rritjes së fibroblastit, faktorit bazik të rritjes së fibroblastit, receptori α1i faktorit neutrofik të qelizave gliale të derivuara nga vija , receptori α2 i faktorit neutrofik të qelizave gliale të derivuara nga vija, proteina të lidhura me rritjen, proteina α të lidhura me rritjen, proteina β të lidhura me rritjen, proteina γ të lidhura me rritjen , faktorit të rritjes epidermale të lidhur me heparinë, faktorit të rritjes së hepatociteve, receptorit të faktorit të rritjes së hepatociteve, faktorit të rritjes të derivuar nga hepatoma, faktorit I i rritjes i ngjashëm-insulin, receptori i faktorit të rritjes i ngjashëm-insulin, faktorit II i rritjes i ngjashëm-insulin, proteina lidhëse e faktorit të rritjes i ngjashëm-insulin, faktorit të rritjes keratinocite, faktorit frenues të leuçemisë, receptori α i faktorit frenues të leuçemisë, faktorit të rritjes së nervit, receptorit të faktorit të rritjes së nervit, neuropoietin, neurotrofin-3, neurotrofin-4, onkostatin M (OSM), faktorit të rritjes së placentës, faktorit 2 të rritjes së placentës, faktorit të rritjes së qelizës endoteliale të derivuar nga pllakëzat e gjakut, faktorit të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, zinxhirit të faktorit A të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, faktorit AA të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, faktorit AB të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, zinxhirit të faktorit B të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, faktorit BB të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, receptori α i faktorit të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, receptori β i faktorit të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut , faktorit të stimulimit të rritjes së qelizës pre-B, faktorit të qelizës stem(SCF), receptorit të faktorit të qelizës stem, TNF, TNF0, TNF1, TNF2, faktorit α i transformimit të rritjes, faktorit β i transformimit të rritjes, faktorit β1 i transformimit të rritjes, faktorit β1.2 i transformimit të rritjes, faktorit β2 i transformimit të rritjes, faktorit β3 i transformimit të rritjes, faktorit β5 i transformimit të rritjes, faktorit β1 i transformimit të rritjes së fshehur, faktorit β të lidhur me proteinën I i transformimit të rritjes, faktorit β e lidhur me proteinën II i transformimit të rritjes, faktorit β e lidhur me proteinën III i transformimit të rritjes, limfopoietin tromik stromal (TSLP), receptor tip I i faktorit të nekrozës së tumorit, receptor tip II i faktorit të nekrozës së tumorit, receptori aktivator i plazminogjenit të tipit - urokinazë, protein fosfolipazë-aktivizuese (PUP), insulin, lektin, ricin, prolaktin, korionik gonadotropin, hormone të stimulimit-folikular, hormone të stimulimit- tiroid, aktivator plazminogjen i indit, IgG, IgE, IgM, IgA, and IgD, α-galaktosidaz, β-galaktosidaz, ADNza, fetuin, hormon luteinizues, estrogjen, albumin, lipoproteina, fetoprotein, transferrin, trombopoietin, urokinaz, integrin, trombin, leptin, Humira (adalimumab), Prolia (denosumab), Enbrel (etanercept), një proteinë nga Tabela 1, ose një fragment biologjikisht aktiv, derivat ose variant i tyre.
3 3. Metoda sipas pretendimit 2 ku një tretësirë që përfshin një përqëndrim fillestar të proteinës terapeutike ndërmjet rreth 0.3 mg/ml dhe rreth 3.0 mg/ml është rregulluar në një vlerë pH ndërmjet rreth 5.0 dhe rreth 8.0 para kontaktit me polimerin e tretshëm në ujë të aktivizuar; për shembull, ku përqëndrimi fillestar i proteinës terapeutike është rreth 1.0 mg/ml dhe pH është rreth 6.0.
4 4. Metoda e pretendimit 2 ku proteina terapeutike është kontaktuar nga një përqëndrim i tepërt i dëshiruar i polimerit të tretshëm në ujë të aktivizuar, ku përqëndrimi i tepërt është ndërmjet rreth 1-molar dhe rreth 300-molar tepri, për shembull rreth 50-palë molar tepri.
5 5. Metoda e pretendimit 4 ku proteina terapeutike është inkubuar me polimerin e tretshëm në ujë të aktivizuar nën kushte që përfshijnë një periudhë kohore ndërmjet 0.5 orë dhe rreth 24 orë; një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë ose mungesën e dritës; dhe me ose pa përzierje; për shembull, ku kushtet përfshijnë një periudhë kohore prej rreth 120 minuta, një temperaturë prej rreth 22°C, mungesën e dritës; dhe me përzierje.
6 6. Metoda sipas pretendimit 2 ku katalisti nukleofilik është shtuar në një sasi për të rezultuar në një përqëndrim final ndërmjet rreth 1.0 mM dhe rreth 50 mM katalist nukleofilik, nën kushte që përfshijnë një periudhë kohore ndërmjet rreth 0.1 minuta dhe rreth 30 minuta; një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë osë mungesën e dritës; dhe me ose pa përzierje; për shembull, ku përqëndimi final i katalistit nukleofilik është rreth 10 mM, dhe kushtet përfaqësojnë një periudhë kohore prej deri në rreth 15 minuta, një temperaturë prej rreth 22°C, mungesa e dritës; dhe me përzierje.
7 7. Metoda sipas pretendimit 2 ku agjenti oksidues është shtuar në një sasi për të rezultuar në një përqëndrim final ndërmjet rreth 50 µM dhe rreth 1000 µM agjent oksidues, që përfshijnë një periudhë kohore ndërmjet rreth 0.1 minuta dhe 120 minuta; një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë osë mungesën e dritës; dhe me ose pa përzierje; për shembull, ku përqëndimi final i agjentit oksidues është rreth 400 µM, dhe kushtet përfshijnë një periudhë kohore prej rreth 10 minuta, një temperaturë prej rreth 22°C, mungesa e dritës dhe me përzierje.
8 8. Metoda e pretendimit 2 ku polimeri lidhës i tretshëm në ujë me pjesën e karbohidratit të oksiduar e proteinës terapeutike është ndalur nga shtimi i një agjenti ftohës të zgjedhur nga grupi i përbërë prej L-cistein, metionin, glutation, glicerol, natrium meta bisulfit (Na2S2O5), triptofan, tirosin, histidin ose derivate të saj, kresol, imidazol, dhe kombinime të tyre; ku agjenti ftohës është shtuar në një sasi që të rezultojë në një përqëndrim final ndërmjet rreth 1 mM dhe rreth 100 mM agjent ftohës, nën kushtet që përfshijnë një periudhë kohore ndërmjet rreth 5 minuta dhe rreth 120 minuta; një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë ose mungesën e dritës; dhe me ose pa përzierje.
9 9. Metoda e pretendimit 8 ku agjenti ftohës është L-cistein, dhe është shtuar në mënyrë të preferueshme për të rezultuar në një përqëndrim final prej rreth 10 mM dhe kushtet përfshijnë një periudhë kohore prej rreth 60 minuta, një temperaturë prej rreth 22°C, mungesa e dritës dhe me përzierje.
10 10. Metoda e pretendimit 2 që përfshin: a) një hap të parë që përfshin rregullimin e vlerës së pH të një tretësire që përfshin proteinën terapeutike me një vlerë pH ndërmjet rreth 5.0 dhe rreth 8.0, ku përqëndrimi i proteinës terapeutike është ndërmjert rreth 0.3 mg/ml dhe rreth 3.0 mg/ml; b) një hap i dytë që përfshin oksidimin e një ose më shumë karbohidrateve në proteinën terapeutike, ku agjenti oksidues është shtuar në tretësirën në hapin e parë për të rezultuar në një përqëndrim final ndërmjet rreth 50µM dhe rreth 1000µM, nën kushtet që përfshijnë një përiudhë kohore ndërmjet rreth 0.1 minuta dhe rreth 120 minuta; një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë ose mungesën e dritës, dhe me ose pa përzierje; c) një hap i tretë që përfshin kontaktimin e proteinës terapeutike me një përqëndrim të tepërt të dëshiruar të polimerit të tretshëm në ujë të aktivizuar, ku përqëndrimi i tepërt është ndërmjet rreth 1-molar tepri dhe rreth 300-molar tepri, nën kushtet që përfshijnë një përiudhë kohore ndërmjet rreth 0.5 orë dhe rreth 24 orë, një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë ose mungesën e dritës; dhe me ose pa përzierje; d) një hap i katërt që përfshin shtimin e katalistit nukleofilik tek tretësira e hapit të tretë, ku katalisti nukleofilik është shtuar për të rezultuar në një përqëndrim final ndërmjet rreth 1 mM dhe rreth 50 mM, nën kushtet që përfshijnë një përiudhë kohore ndërmjet rreth 0.1 minuta dhe rreth 30 minuta; një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë ose mungesën e dritës, dhe me ose pa përzierje; e) një hap i pestë ku proteina terapeutike është inkubuar me polimerin e tretshëm në ujë të aktivizuar dhe katalistin nukleofilik nën kushtet që lejojnë konjugimin e polimerit të tretshëm në ujë të aktivizuar me një ose më shumë karbohidrate të oksiduar në proteinën terapeutike, kushtet e sipërpërmendura që përfshijnë një periudhë kohore ndërmjet rreth 0.5 orë dhe rreth 24 orë, një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë ose mungesën e dritës, dhe me ose pa përzierje; dhe f) një hap i gjashtë ku polimeri i tretshëm në ujë i konjuguar me një ose më shumë karbohidrate të oksiduar të proteinës terapeutike në hapin e pestë është ndaluar nga shtimi i një agjenti ftohës të zgjedhur prej grupit të përbërë prej L-cistein, metionin, glutation, glicerol, Na2S2O5 (natrium meta bisulfit), triptofan, tirozin, histidin ose derivat i saj, kresol, imidazol, dhe kombinime të tyre; ku agjenti ftohës është shtuar për të rezultuar në një përqëndrim final prej rreth 1 mM dhe rreth 100 mM, nën kushtet që përfshijnë një periudhë kohore ndërmjet rreth 5 minuta dhe rreth 120 minuta; një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë ose mungesën e dritës, dhe me ose pa përzierje.
11 11. Metoda e pretendimit 10 ku përqëndrimi fillestar i proteinës terapeutike në hapin e parë është rreth 1 mg/ml dhe pH është rreth 6.0; ku përqëndrimi final i agjentit të oksiduar në hapin e dytë është rreth 400 µM, dhe kushtet përfshijnë një periudhë kohore prej rreth 10 minuta, një temperaturë prej rreth 22°C, mungesën e dritës dhe me përzierje; ku përqëndrimi i tepërt në hapin e tretë është rreth 50 molar tepri; ku kushtet në hapin e tretë përfshijnë një një periudhë kohore prej rreth 15 minuta, një temperaturë prej rreth 22°C, mungesa e dritës dhe me përzierje; ku përqëndrimI final i katalistit nukleofilik në hapin e katërt është rreth 10 mM, dhe kushtet në hapin e katërt përfshijnë një periudhë kohore prej rreth 15 minuta, një temperaturë prej rreth 22°C, mungesën e dritës dhe me përzierje; ku kushtet e inkubimit të proteinës terapeutike me polimerin e tretshëm në ujë të aktivizuar katalistin nukleofilik në hapin e pestë përfshijnë një periudhë kohore prej rreth 2 orë; një temperaturë prej rreth 22°C; mungesën e dritës; dhe me përzierje; dhe ku agjenti ftohës në hapin e gjashtë është L-cistein; dhe ku L-cisteina është shtuar për të rezultuar në një përqëndrim final prej rreth 10 mM dhe kushtet në hapin e gjashtë përfshijnë një periudhë kohore prej rreth 60 minuta, një temperaturë prej rreth 22°C, mungesën e dritës dhe me përzierje.
12 12. Metoda sipas pretendimit 2 ku polimeri i tretshëm në ujë është PSA dhe është i përfshirë prej rreth 10 – 300 njësi të acidit sialik.
13 13. Metoda sipas pretendimit 2 ku kur proteina terapeutike është një proteinë e koagulimit të gjakut, pjesa e karbohidratit të oksiduar të proteinës terapeutike ndodhet në peptidin e aktivizimit të proteinës së koagulimit të gjakut të sipërpërmendur.
14 14. Metoda sipas pretendimit 2 ku polimeri i tretshëm në ujë është PSA dhe ku PSA është përgatitur nga reaksioni me një lidhës aminooksi të aktivizuar me PSA të oksiduar; ku lidhësi aminooksi është zgjedhur nga grupi i përbërë prej: a) një lidhës 3-oksa-pentan-1,5-dioksiamin linker i formulës: b) një lidhës 3,6,9-trioksa-undekan-1, 11-dioksiamin i formulës: dhe c) një lidhës 3,6,9,12,15-pentaoksa-heptadekan-1,17-dioksiamin i formulës: ku PSA është oksiduar nga inkubimi me një agjent oksidues për të formuar një grup aldehid terminal në një fund joreduktues të PSA.
15 15. Metoda sipas çdonjërit prej pretendimeve 1-14 ku agjenti oksidues është NaIO4.
16 16. Metoda sipas çdonjërit prej pretendimeve 1-15 ku katalisti nukleofilik është mundësuar në një përqëndrim ndërmjet rreth 1 mM dhe rreth 50 mM; në mënyrë të preferueshme në një përqëndrim prej rreth 10 mM.
17 17. Metoda sipas çdonjërit prej pretendimeve 1-16 që përfshin më tej hapin e reduktimit të një lidhje oksimë në proteinën terapeutike të konjuguar nga inkubimi i proteinës terapeutike të konjuguar në një zbutës që përfshin një përbërje të reduktimit të zgjedhur nga grupi i përbërë prej natrium cianoborohidrid (NaCNBH3), acid askorbik (vitamin C) dhe NaBH3.
18 18. Metoda sipas çdonjërit prej pretendimeve 1-17 që përfshijnë më tej hapin e pastrimit të proteinës terapeutike të konjuguar; për shembull ku proteina terapeutike e konjuguar është pastruar nga një metodë e zgjedhur nga grupi i përbërë prej kromatografi, filtrim dhe precipitim.
19 19. Metoda sipas pretendimit 18 ku kromatografia është zgjedhur nga grupi i përbërë prej Kromatografisë së Ndërveprimit Hidrofobik (HIC), kromatografisë së Shkëmbimit të Joneve (IEC), kromatografisë së Përjashtimit të Përmasave (SEC), kromatografisë së Tërheqjes, dhe kromatografisë së fazës-së rezervuar, në mënyrë opsionale ku kripa anti-kaotropik është përdorur në një kromatografi të hapit të ngarkimit dhe në një kromatografi të hapit të larjes; në mënyrë opsionale ku kromatografia ndodh në një kolonë, siç është një kolonë që përfshin një kromatografi rrëshire të zgjedhur nga grupi i përbërë prej Fenil-Sefaros FF dhe Butil-Sefaros FF; dhe ku rrëshira është në mënyrë të preferueshme e pranishme në kolonë në një lartësi shtrati prej ndërmjet rreth 5 cm dhe rreth 20 cm, në mënyrë të preferueshme rreth 10 cm.
20 20. Metoda e pretendimit 19 që përfshin një ose më shumë hapa larës ku drejtimi i rrjedhjes është vendosur të rritet dhe ku shkalla e rrjedhjes është ndërmjet rreth 0.2 cm/min dhe rreth 6.7 cm/min, në mënyrë opsionale ku shkalla e rrjedhjes është rreth 2 cm/min.
21 21. Metoda e çdonjërit prej pretendimeve 19-20 që përfshijnë një ose më shumë hapa të elucionit ku drejtimi i rrjeshjes është vendosur të ulet dhe ku shkalla e rrjedhjes është ndërmjet rreth 0.1 cm/min dhe rreth 6.7 cm/min, në mënyrë opsionale ku shkalla e rrjedhjes është rreth 1 cm/min.
22 22. Metoda e çdonjërit prej pretendimeve 18-21 që përfshin më tej përqëndrimin e proteinës terapeutike të konjuguar nga ultra-/diafiltrim (UF/DF); në mënyrë opsionale ku përqëndrimi final i proteinës terapeutike është ndërmjet rreth 0.5 dhe rreth 3 mg/ml.
23 23. Metoda sipas çdonjërit prej pretendimeve 18-22 ku proteina terapeutike përfshin ndërmjet rreth 5 dhe rreth 11 pjesë të polimerit të tretshëm në ujë.
24 24. Metoda e pretendimit 2 ku proteina terapeutike e konjuguar është pastruar duke përdorur kromatografi; ku një kripë anti-kaotropike është përdorur për një hap ngarkimi dhe një hap larës; metoda që përfshin një ose më shumë hapa larës ku drejtimi i rrjedhjes është vendosur të rritet dhe ku shkalla e rrjedhjes është ndërmjet rreth 0.2 cm/min dhe rreth 6.7 cm/min dhe një ose më shumë hapa elucioni ku drejtimi i rrjedhjes është vendosur të ulet dhe ku shkalla e rrjedhjes është ndërmjet rreth 0.2 cm/min dhe rreth 6.7 cm/min; që përfshin më tej përqëndrimin e proteinës terapeutike të konjuguar nga ultra-/diafiltrim (UF/DF); në mënyrë opsionale ku kromatografia është kromatografi e ndërveprimit hidrofobik (HIC); ku shkalla e rrjedhjes së një ose më shumë hapave të larjes është rreth 2 cm/min; dhe ku shkalla e rrjedhjes së një ose më shumë hapave të elucionit është rreth 1 cm/min.
25 25. Një metodë e formimit të një lidhje oksimë ndërmjet një pjese karbohidrati të oksiduar në një proteinë terapeutike dhe një polimer i tretshëm në ujë që përmban një grup aminooksi aktiv që përfshin hapat e: a) oksidimi i një pjese të karbohidratit në një proteinë terapeutike nga inkubimi i proteinës së sipërpërmendur me një agjent oksidues të zgjedhur nga grupi i përbërë prej periodat natriumi (NaIO4), tetraacetat plumbi (Pb(OAc)4) dhe perrutenat kaliumi (KRuO4); dhe b) formimi i një lidhje oksimë ndërmjet pjesës së karbohidratit të oksiduar të proteinës proteinike dhe polimerit të tretshëm në ujë të aktivizuar që përmban një grup aminooksi aktiv në praninë e një katalisti nukleofilik nën kushtet që lejojnë formimin e lidhjes oksime të sipërpërmendur; ku polimeri i tretshëm në ujë i sipërpërmendur që përmban një grup aminooksi aktiv është zgjedhur nga grupi i përbërë prej polietilen glikol (PEG), PEG e degëzuar, PoliPEG® (Polimeret e Efektit Warwick; Coventry, UK), acid polisialik (PSA), polisakarid, pullulan, kitosan, acid hialuronik, kondroitin sulfat, dermatan sulfat, dekstran, karboksimetil-dekstran, oksid polialkilen (PAO), polialkilen glikol (PAG), polipropilen glikol (PPG), polioksazolin, poliakriloilmorfolin, alkool polivinil (PVA), polikarboksilat, polivinilpirolidon, polifosfazen, polioksazolin, polietilen-co-maleik acid anhidrid, polistiren-co-maleik acid anhidrid, dhe poli(1-hidroksimetiletilen hidroksimetilformal) (PHF); ku katalisti nukleofilik është m-toluidin.
26 26. Një metodë e formimit të një lidhje hidrazon ndërmjet një pjese të karbohidratit të oksiduar në një proteinë terapeutike dhe një polimeri të tretshëm në ujë që përmban një grup hidrazide që përfshin hapat e: a) oksidimin e një pjese karbohidrati në një proteinë terapeutike duke inkubuar proteinën e sipërpërmendur me një agjent oksidues të zgjedhur nga grupi i përbërë prej periodat natriumi (NaIO4), tetraacetat plumbi (Pb(OAc)4) dhe perutenat kaliumi (KruO4); dhe b) formimin e një lidhje hidrazon ndërmjet pjesës së karbohidratit të oksiduar të proteinës proteinike dhe polimerit të tretshëm në ujë të aktivizuar që përmban një grup hidrazid aktiv në praninë e një katalisti nukleofilik nën kushtet që lejojnë formimin e lidhjes hidrazon të sipërpërmendur; ku polimeri i tretshëm në ujë i sipërpërmendur që përmban një grup hidrazid aktiv është zgjedhur nga grupi i përbërë prej polietilen glikol (PEG), PEG e degëzuar, PoliPEG® (Polimeret e Efektit Warwick; Coventry, UK), acid polisialik (PSA), polisakarid, pullulan, kitosan, acid hialuronik, kondroitin sulfat, dermatan sulfat, dekstran, karboksimetil-dekstran, oksid polialkilen (PAO), polialkilen glikol (PAG), polipropilen glikol (PPG), polioksazolin, poliakriloilmorfolin, alkool polivinil (PVA), polikarboksilat, polivinilpirolidon, polifosfazen, polioksazolin, polietilen-co-maleik acid anhidrid, polistiren-co-maleik acid anhidrid, dhe poli(1-hidroksimetiletilen hidroksimetilformal) (PHF); ku katalisti nukleofilik është m-toluidin.
27 27. Metoda e pretendimit 26 ku proteina terapeutike është zgjedhur nga grupi i përbërë prej Faktorit IX (FIX), Faktorit VIII (FVIII), Faktorit VIIa (FVIIa), Faktorit Von Willebrand (VWF), Faktorit V (FV), Faktorit X (FX), Faktorit XI (FXI), Faktorit XII (FXII), trombinës (FII), proteinës C, proteinës S, tPA, PAI-1, faktorit ind (TF), ADAMTS 13 proteazë, IL-1 alfa, IL-1 beta, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-11, Faktorit-1të stimulimit të kolonisë (CSF-1), M-CSF, SCF, GM-CSF, faktorit të stimulimit të kolonisë së granulociteve (G-CSF), EPO, interferon-alfa (IFN-alfa), konsensus interferon, IFN-beta, IFN-gama, IFN-omega, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-31, IL-32 alfa, IL-33, trombopoietin (TPO), Ang-1, Ang-2, Ang-4, Ang-Y, polipeptid angiopoietin-ngjashëm 1 (ANGPTL1), polipeptid angiopoietinlik 2 (ANGPTL2), polipeptid angiopoietin-ngjashëm 3 (ANGPTL3), polipeptid angiopoietin-ngjashëm 4 (ANGPTL4), polipeptid angiopoietin-ngjashëm 5 (ANGPTL5), polipeptid angiopoietin-ngjashëm 6 (ANGPTL6), polipeptide angiopoietin-ngjashëm 7 (ANGPTL7), vitronektin, faktorit të rritjes vaskulare endoteliale(VEGF), angiogenin, aktivin A, aktivin B, aktivin C, proteina morfogjenike e kockës-1, proteina morfogjenike e kockës-2, proteina morfogjenike e kockës-3, proteina morfogjenike e kockës-4, proteina morfogjenike e kockës-5, proteina morfogjenike e kockës-6, proteina morfogjenike e kockës-7, proteina morfogjenike e kockës-8, proteina morfogjenike e kockës-9, proteina morfogjenike e kockës-10, proteina morfogjenike e kockës-11, proteina morfogjenike e kockës-12, proteina morfogjenike e kockës-13, proteina morfogjenike e kockës-14, proteina morfogjenike e kockës-15, receptori i proteinës morfogjenike të kockës IA, receptori i proteinës morfogjenike të kockës IB, receptori i proteinës morfogjenike të kockës II, faktorit neurotrofik të derivuar nga truri, kardiotrofin-1, faktorit ciliar neurofilik, receptori i faktorit ciliar neurofilik, kripto, kriptik, faktorit 1 neutrofil kemotaktik i induktuar nga citokina, faktorit 2α neutrofil kemotaktik i induktuar nga citokina, faktorit 2β neutrofil kemotaktik i induktuar nga citokina, faktorit β të rritjes së qelizave endoteliale, endotelin 1, faktorit të rritjes epidermale, epigjen, epiregulin, atraktant neutrofil i derivuar nga epiteliali, faktorit 4 të rritjes së fibroblastit, faktorit 5 të rritjes së fibroblastit faktorit 6 të rritjes së fibroblastit, faktorit 7 të rritjes së fibroblastit, faktorit 8 të rritjes së fibroblastit, faktorit 8b të rritjes së fibroblastit, faktorit 8c të rritjes së fibroblastit, faktorit 9 të rritjes së fibroblastit, faktorit 10 të rritjes së fibroblastit, faktorit 11 të rritjes së fibroblastit, faktorit 12 të rritjes së fibroblastit, faktorit 13 të rritjes së fibroblastit, faktorit 16 të rritjes së fibroblastit, faktorit 17 të rritjes së fibroblastit, faktorit 19 të rritjes së fibroblastit, faktorit 20 të rritjes së fibroblastit, faktorit 21 të rritjes së fibroblastit, faktorit acidik të rritjes së fibroblastit, faktorit bazik të rritjes së fibroblastit, receptori α1 i faktorit neutrofik të qelizave gliale të derivuara nga vija, receptori α2 i faktorit neutrofik të qelizave gliale të derivuara nga vija, proteina të lidhura me rritjen, proteina α të lidhura me rritjen, proteina β të lidhura me rritjen, proteina γ të lidhura me rritjen, faktorit të rritjes epidermale të lidhur me heparinë, faktorit të rritjes së hepatociteve, receptorit të faktorit të rritjes së hepatociteve, faktorit të rritjes të derivuara nga hepatomën, faktorit I i rritjes i ngjashëm-insulin, receptori i faktorit I të rritjes i ngjashëm-insulin, faktorit II i rritjes i ngjashëm-insulin, proteina lidhëse e faktorit të rritjes i ngjashëm-insulin, faktorit të rritjes keratinocite, faktorit frenues të leuçemisë, receptori α i faktorit frenues të leuçemise, faktorit të rritjes së nervit, receptorit të faktorit të rritjes së nervit, neuropoietin, neurotrofin-3, neurotrofin-4, onkostatin M (OSM), faktorit të rritjes së placentës, faktorit 2 të rritjes së placentës, faktorit të rritjes së qelizës endoteliale të derivuar nga pllakëzat e gjakut, faktorit të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, zinxhirit të faktorit A të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, faktorit AA të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, faktorit AB të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, zinxhirit të faktorit B të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, faktorit BB të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, receptori α i faktorit të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, receptori β i faktorit të rritjes së derivuar nga pllakëzat e gjakut, faktorit të stimulimit të rritjes së qelizës pre-B, faktorit të qelizës stem(SCF), receptorit të faktorit të qelizës stem, TNF, TNF0, TNF1, TNF2, faktorit α i transformimit të rritjes, faktorit β i transformimit të rritjes, faktorit β1 i transformimit të rritjes, faktorit β1.2 i transformimit të rritjes, faktorit β2 i transformimit të rritjes, faktorit β3 i transformimit të rritjes, faktorit β5 i transformimit të rritjes, faktorit β1 i transformimit të rritjes së fshehur, faktorit β e lidhur me proteinën I i transformimit të rritjes, faktorit β e lidhur me proteinën II i transformimit të rritjes, faktorit β e lidhur me proteinën III i transformimit të rritjes, limfopoietin timik stromal (TSLP), receptor tip I i faktorit të nekrozës së tumorit, receptor tip II i faktorit të nekrozës së tumorit, receptori aktivator i plazminogjenit të tipit - urokinazë, protein fosfolipazë-aktivizuese (PUP), insulin, lektin, ricin, prolaktin, korionik gonadotropin, hormone të stimulimit-folikular, hormone të stimulimit- tiroid, aktivator plazminogjen i indit, IgG, IgE, IgM, IgA, dhe IgD, α-galaktosidaz, β-galaktosidaz, ADNza, fetuin, hormon luteinizues, estrogjen, albumin, lipoproteina, fetoprotein, transferrin, trombopoietin, urokinaz, integrin, trombin, leptin, Humira (adalimumab), Prolia (denosumab), Enbrel (etanercept), një proteinë nga Tabela 1, ose një fragment biologjikisht aktiv, derivat ose variant i tyre.
28 28. Metoda sipas çdonjërit prej pretendimeve 1-24 ku polimeri i tretshëm në ujë që përmban një grup aminooksi aktiv është përgatitur nga një metodë që përfshin: a) inkubimin e një tretësire që përfshin një polimer të tretshëm në ujë të oksiduar me një lidhës aminooksi të aktivizuar që përfshin një grup aminooksi aktiv nën kushtet që lejojnë formimin e një lidhje oksime të qëndrueshme ndërmjet polimerit të tretshëm në ujë të oksiduar dhe lidhësit aminooksi të aktivizuar, kushtet e sipërpërmendura përfshijnë një periudhë kohore ndërmjet rreth 1 minutë dhe rreth 24 orë; një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë ose mungesën e dritës, dhe me ose pa përzierje; duke formuar kështu një polimer të tretshëm në ujë që përmban një grup aminooksi aktiv; dhe b) pastrimin e polimerit të tretshëm në ujë që përmban një grup aminooksi aktiv nga një metodë e zgjedhur nga grupi i përbërë prej kromatografi, filtrim dhe precipitim.
29 29. Metoda e pretendimit 28 që përfshin më tej hapin e a’) inkubimit të një tretësire që përfshin polimerin e tretshëm në ujë që përmban një grup aminooksi i hapit a) me një agjent reduktues nën kushte që lejojnë formimin e lidhjes alkoksamin të qëndrueshme ndërmjet polimerit të tretshëm në ujë të oksiduar dhe lidhësit aminooksi të aktivizuar, kushtet e sipërpërmendura që përfshijnë një periudhë kohore ndërmjet rreth 1 minutë dhe rreth 24 orë; një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë ose mungesën e dritës; dhe me ose pa përzierje; saqë ai hap (a’) është realizuar pas hapit (a) dhe përpara (b).
30 30. Metoda e pretendimit 28 që përfshin më tej hapin e a’) inkubimit të një tretësire që përfshin polimerin e tretshëm në ujë që përmban një grup aminooksi të hapit a) me një katalist nukleofilik nën kushte që përfshijnë një periudhë kohore ndërmjet 1 minutë dhe 24 orë; një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë ose mungesën e dritës; dhe me ose pa përzierje; saqë ai hap (a’) është realizuar pas hapit (a) dhe përpara (b); në mënyrë opsinale që përfshin më tej hapin e a’’) inkubimit të një tretësire që përfshin polimerin e tretshëm në ujë që përmban një grup aminooksi i hapit b) me një agjent reduktues nën kushte që lejojnë formimin e lidhjes alkoksamin të qëndrueshme ndërmjet polimerit të tretshëm në ujë të oksiduar dhe lidhësit aminooksi të aktivizuar, kushtet e sipërpërmendura që përfshijnë një periudhë kohore ndërmjet rreth 1 minutë dhe rreth 24 orë; një temperaturë ndërmjet rreth 2°C dhe rreth 37°C; në praninë ose mungesën e dritës; dhe me ose pa përzierje; saqë ai hap (a’’) është realizuar pas hapit (a’) dhe përpara hapit (b).
31 31. Metoda sipas çdonjërit prej pretendimeve 28-30 ku polimeri i tretshëm në ujë i oksiduar është zgjedhur nga grupi i përbërë prej polietilen glikol (PEG), PEG e degëzuar, PoliPEG® (Polimeret e Efektit Warwick; Coventry, UK), acid polisialik (PSA), polisakarid, pullulan, kitosan, acid hialuronik, kondroitin sulfat, dermatan sulfat, dekstran, karboksimetil-dekstran, oksid polialkilen (PAO), polialkilen glikol (PAG), polipropilen glikol (PPG), polioksazolin, poliakriloilmorfolin, alkool polivinil (PVA), polikarboksilat, polivinilpirolidon, polifosfazen, polioksazolin, polietilen-co-maleik acid anhidrid, polistiren-co-maleik acid anhidrid, dhe poli(1-hidroksimetiletilen hidroksimetilformal) (PHF); dhe ku polimeri i tretshëm në ujë është oksiduar nga inkubimi me një agjent oksidues për të formuar një grup aldehid përfundimtar në fundin jo-reduktues të polimerit të tretshëm në ujë.
32 32. Metoda sipas pretendimit 31 ku agjenti oksidues është NaIO4.
33 33. Metoda sipas çdonjërit prej pretendimeve 28-32 ku lidhësi aminooksi është zgjedhur nga grupi i përbërë prej: a) një lidhës 3-oksa-pentan-1,5-dioksiamin i formulës: b) një lidhës 3,6,9-trioksa-undekan-1, 11-dioksiamin i formulës: dhe c) një lidhës 3,6,9,12,15-pentaoksa-heptadekan-1,17-dioksiamin i formulës:
34 34. Metoda sipas çdonjërit prej pretendimeve 29 dhe 30 ku agjenti reduktues është zgjedhur nga grupi i përbërë prej cianoborohidrid natriumi (NaCNBH3), acid askorbik (vitamin C) dhe NaBH3.
35 35. Metoda sipas pretendimit 30 ku katalisti nukleofilik është m-toluidin, dhe ku në mënyrë opsionale katalisti nukleofilik është shtuar në një sasi për të rezultuar në një përqëndrim final ndërmjet rreth 1.0 mM dhe rreth 50 mM katalisti nukleofilik.
36 36. Metoda sipas çdonjërit prej pretendimeve 28-35 që përfshijnë më tej përqëndrimin e proteinës terapeutike të konjuguar prej ultra-/diafiltrim (UF/DF).
© 2026 DPPI