Regjistri i Objekteve

Bibliografi

Lloji i Aplikimit

EPO patents

Nënlloji i Aplikimit

EPO Patent

(10) Numri dhe Data e Regjistrimit

8084 2019.04.08

Status

Refuzuar

(180) Data e mbarimit të afatit

2035.04.01

(20) Numri dhe Data e Depozitimit

AL/P/2018/603 2018.09.13

(40) Numri dhe Data e Publikimit

2019.06.03

(86) Data dhe Numri Ndërkombëtar i Depozitimit

15713502.1 2015.04.01

Status

Refuzuar

Data dhe Numri Ndërkombëtar i Publikimit

EP2970413 2018.07.04

(30) Detajet e Prioritetit

Kodi	ID e prioritetit
EP	14162996

(51) Klasat e KNP-së (IPC)

(SQ) 61; 12; 12

(71/73) Aplikanti

Aplikanti	Adresa
Swedish Orphan Biovitrum AB (Publ)

(72) Shpikës

Emri	Adresa
BERGHARD, Charlotta	Tomtebogatan 10 , S-113 39 Stockholm , SE
TJERNBERG, Agneta	Kungsholmstorg 11 , S-112 21 Stockholm , SE
NORDLING, Erik	Sportstugevägen 14A , S-182 35 Danderyd , SE
SVENSSON GELIUS, Stefan	Segeltorpsvägen 48 , S-125 53 Älvsjö , SE

(74) Emri i Përfaqësuesit

Emri	Adresa
Ardit Loloçi	Rr. "Dëshmorët e 4 Shkurtit", Pall. 1/1, Kati 2,Tiranë , AL
Ardit Loloçi	Rr. "Dëshmorët e 4 Shkurtit", Pall. 1/1, Kati 2,Tiranë , AL

(54) Titull

SULFAMIDASE I MODIFIKUAR DHE PRODHIMI I TYRE

(57) Abstrakt

(58) Pretendime

Pretendim	Përshkrim
1	1. Një sulfamidase e modifikuar që përmban substancialisht asnjë epitope për receptorët e njohjes së glikan, ku gjysëm glikan natyral të sulfamidases të përmendur janëndërprerë nga thyerjet lidhëse të vetme dhe thyerjet lidhëse dyshe, shkalla e thyerjeve të lidhëses teke për thyerje lidhëse në total është të paktën 60 % në glikane oligomanos, në këtë mënyrë mundësohet transportimi i sulfamidases të përmendur gjatë barrierës së trupit të gjakut të një gjitari, ku sulfamidase i përmendur ka aktivitet katalitik në trurin e gjitarit të përmendur. 2. Sulfamidase i modifikuar sipas pretendimit 1, që ka një përmbajtje relative të gjysëm glikan natyral intakt të mbetur prej rreth 25 % të përmbajtjes të gjysëm glikan natyral në sulfamidase rekombinant të pamodifikuar. 3. Sulfamidase e modifikuar sipas ndonjë pretendimi paraprijës, që përmban një polipeptidë që konsiston në një sekuencë amino acide sic përcaktohet në SEQ ID NO:1, ose një polipeptidë që ka të paktën 95 % sekuencë të ngjashme me një sekuencë amino acide sic përcaktohet në SEQ ID NO: 1, ku epitopet e përmendur janë të munguar tek të paktën katër ose pesë N-glikosilation vende: N në pozicionin 21 (N(21)), N në pozicionin 122 (N(122)), N në pozicionin 131 (N(131)), N në pozicionin 244 (N(244)), dhe N në pozicionin 393 (N(393)) të SEQ ID NO:1. 4. Sulfamidase e modifukuar sipas pretendimit 3, që përmban një glikan oligomanos tek N(131) vend, oligomanos e përmendur gjëndet e ndërprerë nga thyerja e lidhjes së vetme dhe thyejra e lidhjes dyshe, ndërprerja gjëndet e karakterizuar nga një shtrirje e thyerjes së lidhjes teke tek të paktën 60 %. 5. Sulfamidase e modifikuar sipas ndonjë nga pretendimet 3-4, që përmban një mbetje Cα-formilglicinë në pozicionin 50 të SEQ ID NO:1 (Fgly50) që jep aktivitetin katalitik të përmendur. 6. Një kompozim sulfamidase që përmban sulfamidase të modifikuar që ka substancialisht asnjë epitope për receptorët e njohjes glikan, ku gjysëm glikan natyral e sulfamidase të përmendur janë ndërprerë nga thyerja lidhjes teke dhe thyerja lidhjes dyshe, shkalla e thyerjes së lidhjes teke për thyerje totale të lidhjes është të paktën 60 % në glikane oligomanos, në këtë mënyrë mundësohet transportimi i sulfamidases të përmendur gjatë barierës së trurit të gjakut të gjitarit, dhe që ka një Cα-formilglicinë (Fgly) tek raport serinë (Ser) tek vendi aktivë qëështë më i madhë se 1, në këtë mënyrë jepet aktiviteti katalitik në trurin e gjitarit të përmendur. 7. Një metodë për përgatitjen e sulfamidases të modifikuar, metodë e përmendur që përmban: a) Reaksionin e sulfamidases të glikosilizuar me një periodat metali alkali për një periudhë kohë prej jo më shumë se 4 h, dhe b) Reaksioni i sulfamidases së përmendur me një borohidride metali alkali për një periudhë kohe prej jo më shumë se 2 h; Në këtë mënyrë modifikimi i gjysëm glikan të sulfamidase dhe reduktimi i aktivitetit të sulfamidase në lidhe me receptorët e njohjes glikan, duke mbajtur aktivitetin katalitik të sulfamidases së përmendur, ku sulfamidase e modifikuar e përmendur paraqet aktivitetin katalitik në trurin e gjitarit. 8. Metoda sipas pretendimit 7, ku borohidride e përmendur është përdorur tek një përqëndrim ndërmjet 10 dhe 80 mM. 9. Metoda sipas pretendimit 7 ose 8, ku hapi a) është kryer për një periudhë kohe prej jo më shumë se 3 orë, si jo më shumë se 2 orë, si jo më shumë se 1 orë, si rreth 0.5 orë. 10. Metoda sipas ndonjë nga pretendimet 7-9, ku hapi a) dhe hapi b) janë kryer në sekuencë pa kryer një hap të ndërmjetëm. 11. Metoda sipas ndonjë nga pretendimet 7-10, ku hapi a) është më tej i karakterizuar nga të paktën një nga, si të paktën dy, se të gjitha i)-iii): i) Periodat metali alkali është sodium meta-periodat; ii) Periodat i përmendur është përdorur tek një përqëndrim prej jo më shumë se 20 mM, si jo më shumë se 15 mM, si rreth 10 mM, dhe iii) Reaksioni i përmendur është kryer tek një temperaturë prej rreth 0 dhe 22o, si temperaturë nga 0-8oC, si tek një temperaturë 0-4oC si rreth 8oC, si rreth 0oC. 12. Metoda sipas ndonjë nga pretendimet 7-11, ku hapi b) është më tej i karakterizuar nga të paktën një prej, si të paktën dy, si të gjitha nga i)-iv): i) Borohidride metali alkali të përmendur është borohidride sodium; ii) Borohidride i përmendur është përdorur tek një përqëndrim prej jo më shumë se 4 herë përqëndrimi i periodatë të përmendur, si jo më shumë se 3 herë përqëndrimi i periodat të përmendur, si jo më shumë se 2.5 herë përqëndrimi i periodatë të përmendur, si 0.5 deri 4 herë përqëndrimi i periodat të përmendur: iii) Reaksioni i përmendur është kryer për një periudhë kohe jo më shumë se 1.5 orë, si jo më shumë se 1 orë, si jo më shumë se 0.75 orë, si rreth 0.5 orë, dhe iv) Reaksioni i përmendur është kryer tek një temperaturë prej rreth 0 dhe 8oC. 13. Metoda sipas ndonjë nga pretendimet 7-12, që përmban më tej a2) që shuan reaksionin që rezulton nga hapi a), dhe/ose b2) që shuan reaksionin që rezulton nga hapi b). 14. Një sulfamidase i modifikuar i marrë nga metoda sipas ndonjë nga pretendimet 7-13. 15. Sulfamidase e modifikuar ose kompozimi sulfamidase sipas ndonjë nga pretendimet 1-6 dhe 14, për përdorim në terapi. 16. Sulfamidase e modifikuar ose kompozimi sulfamidase sipas pretendimit 15, për përdorim në trajtimin e një gjitari që vuan nga një sëmundje ruajtjes lisosomal, në vecanti mucopolisakaridosis IIIA (MPS IIIA).

Pretendim

Përshkrim

1. Një sulfamidase e modifikuar që përmban substancialisht asnjë epitope për receptorët e njohjes së glikan, ku gjysëm glikan natyral të sulfamidases të përmendur janëndërprerë nga thyerjet lidhëse të vetme dhe thyerjet lidhëse dyshe, shkalla e thyerjeve të lidhëses teke për thyerje lidhëse në total është të paktën 60 % në glikane oligomanos, në këtë mënyrë mundësohet transportimi i sulfamidases të përmendur gjatë barrierës së trupit të gjakut të një gjitari, ku sulfamidase i përmendur ka aktivitet katalitik në trurin e gjitarit të përmendur. 2. Sulfamidase i modifikuar sipas pretendimit 1, që ka një përmbajtje relative të gjysëm glikan natyral intakt të mbetur prej rreth 25 % të përmbajtjes të gjysëm glikan natyral në sulfamidase rekombinant të pamodifikuar. 3. Sulfamidase e modifikuar sipas ndonjë pretendimi paraprijës, që përmban një polipeptidë që konsiston në një sekuencë amino acide sic përcaktohet në SEQ ID NO:1, ose një polipeptidë që ka të paktën 95 % sekuencë të ngjashme me një sekuencë amino acide sic përcaktohet në SEQ ID NO: 1, ku epitopet e përmendur janë të munguar tek të paktën katër ose pesë N-glikosilation vende: N në pozicionin 21 (N(21)), N në pozicionin 122 (N(122)), N në pozicionin 131 (N(131)), N në pozicionin 244 (N(244)), dhe N në pozicionin 393 (N(393)) të SEQ ID NO:1. 4. Sulfamidase e modifukuar sipas pretendimit 3, që përmban një glikan oligomanos tek N(131) vend, oligomanos e përmendur gjëndet e ndërprerë nga thyerja e lidhjes së vetme dhe thyejra e lidhjes dyshe, ndërprerja gjëndet e karakterizuar nga një shtrirje e thyerjes së lidhjes teke tek të paktën 60 %. 5. Sulfamidase e modifikuar sipas ndonjë nga pretendimet 3-4, që përmban një mbetje Cα-formilglicinë në pozicionin 50 të SEQ ID NO:1 (Fgly50) që jep aktivitetin katalitik të përmendur. 6. Një kompozim sulfamidase që përmban sulfamidase të modifikuar që ka substancialisht asnjë epitope për receptorët e njohjes glikan, ku gjysëm glikan natyral e sulfamidase të përmendur janë ndërprerë nga thyerja lidhjes teke dhe thyerja lidhjes dyshe, shkalla e thyerjes së lidhjes teke për thyerje totale të lidhjes është të paktën 60 % në glikane oligomanos, në këtë mënyrë mundësohet transportimi i sulfamidases të përmendur gjatë barierës së trurit të gjakut të gjitarit, dhe që ka një Cα-formilglicinë (Fgly) tek raport serinë (Ser) tek vendi aktivë qëështë më i madhë se 1, në këtë mënyrë jepet aktiviteti katalitik në trurin e gjitarit të përmendur. 7. Një metodë për përgatitjen e sulfamidases të modifikuar, metodë e përmendur që përmban: a) Reaksionin e sulfamidases të glikosilizuar me një periodat metali alkali për një periudhë kohë prej jo më shumë se 4 h, dhe b) Reaksioni i sulfamidases së përmendur me një borohidride metali alkali për një periudhë kohe prej jo më shumë se 2 h; Në këtë mënyrë modifikimi i gjysëm glikan të sulfamidase dhe reduktimi i aktivitetit të sulfamidase në lidhe me receptorët e njohjes glikan, duke mbajtur aktivitetin katalitik të sulfamidases së përmendur, ku sulfamidase e modifikuar e përmendur paraqet aktivitetin katalitik në trurin e gjitarit. 8. Metoda sipas pretendimit 7, ku borohidride e përmendur është përdorur tek një përqëndrim ndërmjet 10 dhe 80 mM. 9. Metoda sipas pretendimit 7 ose 8, ku hapi a) është kryer për një periudhë kohe prej jo më shumë se 3 orë, si jo më shumë se 2 orë, si jo më shumë se 1 orë, si rreth 0.5 orë. 10. Metoda sipas ndonjë nga pretendimet 7-9, ku hapi a) dhe hapi b) janë kryer në sekuencë pa kryer një hap të ndërmjetëm. 11. Metoda sipas ndonjë nga pretendimet 7-10, ku hapi a) është më tej i karakterizuar nga të paktën një nga, si të paktën dy, se të gjitha i)-iii): i) Periodat metali alkali është sodium meta-periodat; ii) Periodat i përmendur është përdorur tek një përqëndrim prej jo më shumë se 20 mM, si jo më shumë se 15 mM, si rreth 10 mM, dhe iii) Reaksioni i përmendur është kryer tek një temperaturë prej rreth 0 dhe 22o, si temperaturë nga 0-8oC, si tek një temperaturë 0-4oC si rreth 8oC, si rreth 0oC. 12. Metoda sipas ndonjë nga pretendimet 7-11, ku hapi b) është më tej i karakterizuar nga të paktën një prej, si të paktën dy, si të gjitha nga i)-iv): i) Borohidride metali alkali të përmendur është borohidride sodium; ii) Borohidride i përmendur është përdorur tek një përqëndrim prej jo më shumë se 4 herë përqëndrimi i periodatë të përmendur, si jo më shumë se 3 herë përqëndrimi i periodat të përmendur, si jo më shumë se 2.5 herë përqëndrimi i periodatë të përmendur, si 0.5 deri 4 herë përqëndrimi i periodat të përmendur: iii) Reaksioni i përmendur është kryer për një periudhë kohe jo më shumë se 1.5 orë, si jo më shumë se 1 orë, si jo më shumë se 0.75 orë, si rreth 0.5 orë, dhe iv) Reaksioni i përmendur është kryer tek një temperaturë prej rreth 0 dhe 8oC. 13. Metoda sipas ndonjë nga pretendimet 7-12, që përmban më tej a2) që shuan reaksionin që rezulton nga hapi a), dhe/ose b2) që shuan reaksionin që rezulton nga hapi b). 14. Një sulfamidase i modifikuar i marrë nga metoda sipas ndonjë nga pretendimet 7-13. 15. Sulfamidase e modifikuar ose kompozimi sulfamidase sipas ndonjë nga pretendimet 1-6 dhe 14, për përdorim në terapi. 16. Sulfamidase e modifikuar ose kompozimi sulfamidase sipas pretendimit 15, për përdorim në trajtimin e një gjitari që vuan nga një sëmundje ruajtjes lisosomal, në vecanti mucopolisakaridosis IIIA (MPS IIIA).