Regjistri i Objekteve

Bibliografi

Lloji i Aplikimit

EPO patents

Nënlloji i Aplikimit

EPO Patent

(10) Numri dhe Data e Regjistrimit

7155 2018.03.27

Status

Regjistruar

(180) Data e mbarimit të afatit

2032.07.13

(20) Numri dhe Data e Depozitimit

AL/P/2018/71 2018.02.01

(40) Numri dhe Data e Publikimit

2018.04.30

(86) Data dhe Numri Ndërkombëtar i Depozitimit

12737492.4 2012.07.13

Status

Regjistruar

Data dhe Numri Ndërkombëtar i Publikimit

EP2731973 2017.11.15

(30) Detajet e Prioritetit

Kodi	ID e prioritetit
EP	11173880

(51) Klasat e KNP-së (IPC)

(71/73) Aplikanti

Aplikanti	Adresa
UCB Biopharma SPRL	Allée de la Recherche 60 1070 Brussels / BE

(72) Shpikës

Emri	Adresa
HUMPHREYS, David Paul	c/o IPD UCB Celltech 208 Bath Road Slough Berkshire SL1 3WE / GB , GB
ELLIS, Mark	c/o IPD UCB Celltech 208 Bath Road Slough Berkshire SL1 3WE / GB , GB

(74) Emri i Përfaqësuesit

Emri	Adresa
Drivalda Brecani	Rruga "Tre Vellezrit Kondi", pranë vilave Amerikane, Tiranë, Shqipëri, AL , AL
Drivalda Brecani	Rruga "Tre Vellezrit Kondi", pranë vilave Amerikane, Tiranë, Shqipëri, AL , AL

(54) Titull

Strain bakterial prites shkruan rekombinatin DSBC

(57) Abstrakt

(58) Pretendime

Pretendim	Përshkrim
1	Një qelizë bakteriale gram-negative rekombinante që përmban: a) një vektor shprehës që përmban një polinukleotid rekombinant që kodon DsbC; dhe b) nje ose me shume polinukleotide qe kodifikojne nje antitrup ose nje fragment lidhes antigjeni qe lidhet ne menyre specifike me CD154; c) një gjen Tsp mutant që kodon një proteinë Tsp që ka 50% ose më pak të aktivitetit të proteazës së një proteine Tsp jo mutante të tipit të egër siç tregohet në SEQ ID NO: 26 dhe; d) një gjen spr mutant i cili kodon një proteinë spr, sekuenca e tipit te egër të së cilës është treguar në SEQ ID NO: 24 përmban një mutacion që prek aminoacidin C94; dhe ku qeliza bakteriale Gram-negative ne fjale, është përzgjedhur nga E.coli terheq K12 dhe W3110 dhe ku qeliza bakteriale është izogjenike ndaj terheqjeve të përmendura, me perjashtim te polinukleotidit rekombinant që kodon DsbC, një ose më shumë polinukleotide që kodojne një antitrup ose një fragment lidhes antigjeni qe specifikisht lidhet me CD154 dhe gjenin Tsp i mutuar dhe gjeni spr i mutuar .
2	Qeliza bakteriale Gram-negative sipas pretendimit 1, ku DsbC përmban një lidhje histidine në nyjen-N ose në nyjen-C.
3	Qeliza bakteriale Gram-negative sipas pretendimit 1 ose 2, ku vektori shprehes permban nje polinukleotid qe ka sequencen e dhene ne SEQ ID NO:45 ose SEQ ID NO:51
4	Qeliza bakteriale Gram-negative sipas secilit nga pretendimit 1 deri ne 3, ku antitrupi ose nje fragment lidhes antigjeni perbehet nga nje domain variabel i zinxhirit te rende qe perfshin tre CDR qe kane sequencen e dhene ne SEQ ID NO: 1 per CDRH1, SEQ ID NO: 2, per CDRH2 dhe SEQ ID NO: 3 per CDRH3 dhe nje domain variabel te zinxhirit te lehte qe perfshin tre CDR qe kane sequencen e dhene ne SEQ ID NO: 4 per CDRL1, SEQ ID NO: 5 per CDRL2 dhe SEQ ID NO: 6 per CDRL3.
5	Qeliza bakteriale Gram-negative sipas pretendimit 4, ku një ose më shumë polinukleotide kodojnë një antitrup qe perfshin sekuencen rajonale variable te zinxhirit te lehte te dhene ne SEQ ID NO:8 dhe sekuencen variable te zinxhirit te rende dhene në SEQ ID NO: 10.
6	Qeliza bakteriale Gram-negative sipas secilit nga pretendimet 1 deri ne 5,ku antitrupi eshte nje Fab ose fragment Fab.
7	Qeliza bakteriale Gram-negative sipas pretendimit 6, ku Fab ose fragmenti Fab përmban një zinxhir të lehtë që ka sekuencën e dhënë në SEQ ID NO: 12 dhe një zinxhir të rëndë që ka sekuencën e dhënë në SEQ ID NO: 14 ose 16.
8	Qeliza bakteriale Gram-negative sipas secilit prej pretendimeve nga 1 ne 7, ku qeliza bakteriale Gram-negative perfshin nje vektor te pare shprehes qe permban nje polynukleotid rekombinant qe kodon DsbC dhe nje vektor te dyte shprehes qe perfshin nje ose me shume polinukleotide qe kodojne nje antitrup ose fragment lidhes antigjen veçanërisht i lidhur me CD154.
9	Qeliza bakteriale Gram-negative sipas secilit prej pretendimeve nga 1 deri ne 7, ku vektori i shprehjes qe permban nje polinukleotid rekombinant qe kodon DsbC gjithashtu permban nje ose me shume polinukleotide qe kodojne nje antitrup ose nje fragment lidhes antigjeni specifikisht i lidhur me CD154.
10	Qeliza bakteriale Gram-negative sipas secilit nga pretendimet e meparshme, ku mutacioni ne gjenin spr, qe kodon nje proteine spr, rezulton ne nje ndryshim te aminoacidit cisteine ne alanine ne pozicionin 94 (C94A).
11	Qeliza bakteriale Gram-negative sipas secilit nga pretendimet 1 deri ne 10, qe perfshin nje vektor shprehes qe permban nje polinukleotid rekombinant qe kodon DsbC dhe nje mesazh dicistronik per prodhimin e nje antitrupi ose nje fragmenti lidhës antigjeni specifikisht i lidhur me CD154, ne te cilin cistroni i siperm permban kodin e ADN-se per zinxhirin e lehtë të antitrupit dhe cistroni i poshtem përmban kodin e ADN-së për zinxhirin e rëndë korrespondues, karakterizuar në atë që mesazhi dicistronikë përmban një sekuencë të përzgjedhur nga IGS1 (SEQ ID NO: 33), IGS2 (SEQ ID NO: , IGS3 (SEQ ID NO: 35) dhe IGS4 (SEQ ID NO: 36).
12	Nje metode per prodhimin e nje antitrupi ose nje fragmenti lidhes antigjeni specifik i lidhur me CD154, permban : a) kultivimin e një qelize bakteriale gram-negative rekombinante siç përcaktohet në cilindo nga pretendimet 1 deri 11 në një mjedis kultivimi mesatar të kushteve efektive për të shprehur antitrupin ose fragmentin lidhës të antigjenit që lidhet në mënyrë specifike me CD154 dhe polinukleotidin rekombinant që kodon DsbC; dhe b) rikuperimi i antitrupit ose një fragmenti lidhes antigjeni që lidhet veçanërisht me CD154 nga periplazma e qelizës bakteriale gram-negative rekombinante dhe / ose në mjedisin e kultivimit.
13	Nje metode sipas pretendimeve 12, ku metoda me tej perfshin nje hap qe ben lidhjen e nje molekule qe i pergjigjet stimulimit me nje amino acid ne ose drejt fundit te nyjes C te zinxhirit te rende dhe / ose zinxhirit te lehte te antitrupit.
14	Një metodë sipas pretendimit 13, ku molekula qe i pergjigjet stimulimit përfshin poli (etilen glikol) ose poli metoksi (etilen glikol).
15	Një metodë sipas pretendimit 14, ku metoda përfshin lidhjen me një nga mbetjet e cisteinës në fundin e nyjes C të zinxhirit të rëndë ,te një grup lizil-maleimid ku secili grup amino i mbetjeve lizile ka lidhur ne menyre kovalente me të ,një mbetje poli metoksi (etilen glikol) me një peshë molekulare prej rreth 20,000 Da.