Lloji i Aplikimit
EPO patents
Nënlloji i Aplikimit
EPO Patent
(10) Numri dhe Data e Regjistrimit
4748
2014.06.18
Status
Refuzuar
(180) Data e mbarimit të afatit
2031.09.01
(20) Numri dhe Data e Depozitimit
AL/P/2014/123
2014.04.25
(40) Numri dhe Data e Publikimit
2014.07.15
(86) Data dhe Numri Ndërkombëtar i Depozitimit
11752530.3
2011.09.01
Status
Refuzuar
Data dhe Numri Ndërkombëtar i Publikimit
EP2480678
2014.02.12
(30) Detajet e Prioritetit
| Kodi | ID e prioritetit |
|---|---|
| EP | 10175088 |
(51) Klasat e KNP-së (IPC)
(71/73) Aplikanti
| Aplikanti | Adresa |
|---|---|
| Molmed SpA | Via Olgettina 58 20132 Milan |
(72) Shpikës
| Emri | Adresa |
|---|---|
| BOVOLENTA, Chiara | MolMed SpA, Via Olgettina 58 I-20132 Milan , IT |
| STORNAIUOLO, Anna | MolMed SpA, Via Olgettina 58 I-20132 Milan , IT |
| RIZZARDI, Paolo | MolMed SpA, Via Olgettina 58 I-20132 Milan , IT |
| MAVILIO, Fulvio | Istituto Scientifico H. San Raffaele, Via Olgettina 58 I-20132 Milan , IT |
(74) Emri i Përfaqësuesit
| Emri | Adresa |
|---|---|
| Krenar LOLOCI | Rr. "Dëshmorët e 4 Shkurtit", Pall. 1/1, Kati 2, Tiranë , AL |
| Krenar LOLOCI | Rr. "Dëshmorët e 4 Shkurtit", Pall. 1/1, Kati 2, Tiranë , AL |
(54) Titull
PRODHIMI I QENDRUESHËM I VEKTORËVE LENTIVIRAL
(57) Abstrakt
(58) Pretendime
| Pretendim | Përshkrim |
|---|---|
| 1 | . Një metodë për të përfituar një lentiviral të qendrueshëm që paketon vijën qelizore që përfshin: i. përgatitja e një vektori hibrid (A) që përfshin bakuloviralin e shtyllës kurrizore që përmban një bobinë të integruar të rrethuar nga AAV ITR që përfshin dy bobina të shprehura, ku shprehja e parë kodon gjenet gag dhe pol lentivirale dhe i dyti rev lentiviral dhe një shënues antibiotik përzgjedhës dhe ii. përgatitja e një plasmidi shprehës (B) që përmban një AAV rep Kornizë Lexuese të Hapur (Open Reading Frame) nën kontrollin e një nxitësi iii. transferimi i qelizave me një shprehje plasmidi B dhe infektimi i menjëhershëm i qelizave me vektorin hibrid A iv. kulturimi i qelizave në prani të një antibiotiku për përzgjedhje v. përfitimi i qelizave në mënyrë të qendrueshme që shprehin proteinat gag, pol dhe rev vi. integrimi i një gjeni env në qeliza duke përdorur një vektor shprehës vii. kulturimi i qelizave për të përfituar një linjë qelizore në mënyrë të qendrueshme që shprehin proteinat gag, pol rev dhe env |
| 2 | Një metodë për të perfituar një lentiviral të qendrueshëm që paketon vijën qelizore që përfshin: i. përgatitja e një vektori hibrid (A) që përfshin bakuloviralin e shtyllës kurrizore që përmban një bobinë të integruar të rrethuar nga virusi shoqërues -adeno (AAV) i kthyer në terminalin përsëritës (ITRs) që përfshin dy bobina shprehëse, ku bobina shprehëse e parë kodon gjenet lentivirale gag dhe pol dhe e dyta rev lentiviral dhe një shënues antibiotik përzgjedhës, dhe ii. . përgatitja e një plasmidi shprehës (B) që përmban AAV rep ORF nën kontrollin e një nxitësi iii. transferimi i qelizave me një shprehje plasmidi B dhe infektimi i menjëhershëm i qelizës me vektorin hibrid A iv. kulturimi i qelizave në prani të një antibiotiku për përzgjedhje v. përfitimi i qelizave në mënyrë të qendrueshme që shprehin proteinat gag, pol dhe rev vi. integrimi i një gjeni lentiviral tat në qeliza të tilla duke përdorur një vektor shprehës vii. kulturimi i qelizave për të përfituar një linjë qelizore në mënyrë të qendrueshme që shprehin proteinat gag, pol rev dhe tat viii. integrimi i një gjeni env në qeliza duke përdorur një vektor shprehës ix. kulturimi i qelizave për të përfituar një linjë qelizore në mënyrë të qendrueshme që shprehin proteinat gag, pol rev, tat dhe env |
| 3 | Një metodë sipas pretendimit 1 ose 2 ku dy bobinat shprehëse të vektorit hibrid janë të orientuara bisht me bisht dhe secila prej tyre drejtohet nga një nxitës konstitutiv dhe mbart një pol A |
| 4 | Një metodë sipas pretendimit 3 ku nxitësi është zgjedhur nga CMV, CMV IE, PGK, SV40, eF1α, SFFV, dhe RSV |
| 5 | Një metodë sipas pretendimit 4 ku nxitësi është CMV IE |
| 6 | Një metodë sipas çdonjë prej pretendimeve 1 deri në 5 ku shënuesi përzgjedhës është zgjedhur nga gjenet rezistent higromicin, kanamicin, neomicin ose zeomicin |
| 7 | Një metodë sipas pretendimit 6 ku shënuesi përzgjedhës është gjeni rezistent higromicin |
| 8 | Një metodë sipas pretendimit 1 ose 7 ku shenuesi përzgjedhës është klonuar në drejtim të një IRES |
| 9 | Një metodë sipas çdonjë prej pretendimeve 1 deri në 8 ku proteina AAV Rep është Rep78. |
| 10 | Një metodë sipas çdonjë prej pretendimeve 1 deri në 9 ku gjeni env është zgjedhur nga MLV 4070 env, RD114 env, proteina kimerike e membranës RD114-TR, proteina kimerike e membranës RD114-pro, bakulovirusi GP64 env ose GALV env ose derivatet e tyre |
| 11 | Një metodë sipas pretendimit 10 ku gjeni env është gjeni që kodon proteinën kimerike të membranës RD114-TR |
| 12 | Një metodë sipas pretendimit 11 ku RD114-TR është integruar duke përdorur një vektor lentiviral SIN që përfshin një bobinë shprehëse që përmban 5’ deri në 3’ end një nxitës CMV β-globin intron që përmban një element RRE në sekuencen e tij dhe RD114-TR ORF. |
| 13 | Një lentiviral i qendrueshëm që paketon vijën qelizore i integruar në gjenomin e tij: i. të paktën një kopje të një bobine të integruar të rrethuar nga AAV ITRs duke përfshirë dy bobina shprehëse, ku bobina shprehëse e parë kodon gjenet lentivirale gag dhe pol dhe e dyta lentiviralin rev dhe një shënues përzgjedhës ii. të paktën një kopje të një gjeni env |
| 14 | Një lentiviral i qendrueshëm që paketon vijën qelizore sipas pretendimit 13 ku qeliza më tej përmban në mënyrë të qëndrueshme gjenin HIV-1 tat të integruar në gjenomet e tij |
| 15 | Një lentiviral i qendrueshëm që paketon vijën qelizore sipas pretendimit 13 ose 14 ku qeliza është vijë qelizore humane e zgjedhur nga HEK293, HEK293-T, HEK293-SF, TE671, HT1080 ose HeLa |
| 16 | Një lentiviral i qendrueshëm që paketon vijën qelizore sipas çdonjë prej pretendimeve 13 deri në 15 ku dy bobinat shprehëse të bobinës së integruar janë të orientuara bisht me bisht tek njëra-tjetra dhe secila prej tyre drejtohet nga një nxitës konstitutiv dhe mbartës i një poli A |
| 17 | Një lentiviral i qendrueshëm që paketon vijën qelizore sipas çdonjë prej pretendimeve 13 deri në 16 nxitësi është zgjedhur nga CMV, CMV IE, PGK, SV40, eF1α, SFFV, dhe RSV |
| 18 | Një lentiviral i qendrueshëm që paketon vijën qelizore sipas çdonjë prej pretendimeve 13 deri në 17 ku shënuesi përzgjedhës është zgjedhur nga gjenet rezistente higromicin, kanamicin, neomicin ose zeomicin |
| 19 | Një lentiviral i qendrueshëm që paketon vijën qelizore sipas çdonjë prej pretendimeve 13 deri në 18 ku gjeni env është zgjedhur nga, MLV 4070 env, RD114 env, proteina kimerike e membranës RD114-TR, proteina kimerike e membranës RD114-pro, bakulovirusi GP64 env ose GALV env ose derivatet e tyre |
| 20 | Një lentiviral i qendrueshëm që paketon vijën qelizore sipas çdonjë prej pretendimeve 13 deri në 19 ku gjeni env është gjeni që kodon proteinën kimerike të membranës RD114-TR |
| 21 | Një metodë për prodhimin e vektorëve lentiviral që përfshin: i. Kulturimin e një lentivirali të qendrueshëm që paketon vijën qelizore sipas çdonjë prej pretendimeve 13 deri në 20 ii. Futjen e një vektori transferues në paketimin e qëndrueshëm të linjës qelizore |
| 22 | Një prodhues linje qelizore që përmban integrimin e qendrueshem brenda gjenomit te tij: i. të paktën një kopje të një bobine të integruar të rrethuar nga AAV ITRs duke përfshirë dy bobina shprehëse, bobina e parë shrehëse kodon gjenet lentivirale gag dhe pol dhe e dyta lentiviralin rev dhe një shënues përzgjedhës ii. të paktën një kopje të një env iii. një vektor transferues |
| 23 | Një prodhues linje qelizore sipas pretendimit 22 ku qeliza më tej pëmban të paktën një kopje të një gjeni lentiviral tat të integruar brenda gjenomit të tij |
| 24 | Një prodhues linje qelizore sipas pretendimit 22 ose 23 ku qeliza ështe një linjë qelizore humane e zgjedhur nga HEK293, HEK293-T, HEK293-SF, TE671, HT1080 ose HeLa |
| 25 | Një prodhues linje qelizore sipas çdonjë prej pretendimeve 22 deri në 24 ku dy bobinat shprehëse të vektorit hibrid janë të orientuara bisht me bisht dhe secila është drejtuar nga një nxitës konstruktiv dhe mbartës i një poli A |
| 26 | Një prodhues linje qelizore sipas çdonjë prej pretendimeve 22 deri në 25 ku nxitësi është zgjedhur nga CMV, CMV IE, PGK, SV40, eF1α, SFFV, dhe RSV |
| 27 | Një prodhues linje qelizore sipas çdonjë prej pretendimeve 22 deri në 26 ku shënuesi përzgjedhës është zgjedhur nga gjenet rezistente higromicin, kanamicin, neomicin ose zeomicin |
| 28 | Një prodhues linje qelizore sipas çdonjë prej pretendimeve 22 deri në 27 ku gjeni env është zgjedhur nga MLV 4070 env, RD114 env, proteina kimerike e membranës RD114-TR, proteina kimerike e membranës RD114-pro, bakulovirusi GP64 env ose GALV env ose derivatet e tyre |
| 29 | Një prodhues linje qelizore sipas çdonjë prej pretendimeve 22 deri në 28 ku gjeni env është gjeni kodues i proteinës kimerike të membranës RD114-TR |
| 30 | Një metodë për prodhimin e vektorëve lentiviral që përfshin: i. kulturimin e linjës qelizore prodhuese sipas çdonjë prej pretendimeve 22 deri në 29 |