Lloji i Aplikimit
EPO patents
Nënlloji i Aplikimit
EPO Patent
(10) Numri dhe Data e Regjistrimit
4956
2014.12.17
Status
Refuzuar
(180) Data e mbarimit të afatit
2026.03.09
(20) Numri dhe Data e Depozitimit
AL/P/2014/8
2014.01.09
(40) Numri dhe Data e Publikimit
2015.03.13
(86) Data dhe Numri Ndërkombëtar i Depozitimit
06716299.0
2006.03.09
Status
Refuzuar
Data dhe Numri Ndërkombëtar i Publikimit
EP1856272
2013.09.11
(30) Detajet e Prioritetit
| Kodi | ID e prioritetit |
|---|---|
| KR | 20050020367 |
(51) Klasat e KNP-së (IPC)
(71/73) Aplikanti
| Aplikanti | Adresa |
|---|---|
| Sewon Cellontech Co., Ltd. | 10, 11th., Goodmorning-Shinhan Tower 23-2, Yoido-Dong Youngdeungpo-Gu, Seoul 150-712 |
(72) Shpikës
| Emri | Adresa |
|---|---|
| YU, Ji-Chul 102-301 Kunyoung APT. | Sangdo 2(i)-dong, Dongjak-gu Seoul 156-302 , KR |
| JANG, Jae-Deog 7-405 Lotte APT. | Junggye 2(i)-dong, Nowon-gu Seoul 139-784 , KR |
| CHANG, Cheong-Ho 503-802 Samhogarden. | Banpo-dong, Seocho-gu Seoul 137-040 , KR |
| LEE, Sae-Bom 1008-502 Hyundai APT. | Gwangjang-dong, Gwangjin-gu Seoul 143-769 , KR |
| YEO, Se-Geun 202 ho, 40-23, Singil 2(i)-dong | Yeongdeungpo-gu Gyeonggi-do 150-052 , KR |
| KO, Chang-Kwon 102-1203 Sungwon APT. | Junggye 1(il)-dong, Nowon-gu Seoul 139-921 , KR |
(74) Emri i Përfaqësuesit
| Emri | Adresa |
|---|---|
| Ela SHOMO PANIDHA | Euromarkpat Albania LTD , Rr. A.Z. Çajupi, Pall. 20/4, Ap.15, Tiranë , AL |
| Ela SHOMO PANIDHA | Euromarkpat Albania LTD , Rr. A.Z. Çajupi, Pall. 20/4, Ap.15, Tiranë , AL |
(54) Titull
METODE PER NDARJEN E KOLAGJENIT NGA INDET E KAFSHES, METODE PRODHIMI SOLUCION KOLAGJENI DHE PRODUKT I PRODHUAR DUKE PERDORUR METODEN
(57) Abstrakt
(58) Pretendime
| Pretendim | Përshkrim |
|---|---|
| 1 | Nje metode per ndarjen e kolagjenit nga nje ind kafshe, duke perfituar kolagjen 5 deri ne 10% te peshes fillestare te indit, qe perfshin 1. larjen mire te nje indi te kockes derrit te izoluar me uje te distiluar, etanol dhe aceton; 2. prerjen e indit te kockes ne formen e nje rrote dhe ruajtjen ne -20ºC; 3. kthimin e indit te kockes ne puder qe ka permase grimce 1 deri ne 500 mikrometra, ne menyre qe te ndahet kolagjeni nga indi i kockes; 4. larjen e pudres se indit kockor me etanol dhe uje te distiluar; 5. trjatimin e pudres se kockes se lare ne kete menyre pergjate gjithe nates me 0.5N HCl nderkohe qe tundet ne 10 deri 100 rpm; 6. trajtimin e pudres se kockes me pepsine (10 deri 50:1 raporti i indit:pepsines, dhe tretur ne 0.1N HCl perpara perdorimit), pas trajtimit pergjate gjithe nates; 7. perseritja e trajtimit me pepsine 2 deri ne 5 here per 3 deri 7 dite; 8. centrifugimin e solucionit te pudres kockore te trajtuar me pepsine ne 4 ºC dhe 12,000g per 30 min. dhe me tej ndarjen dhe ruajtjen e nje pluskuesi dhe kthimin e nje precipitati ne hapin 7; 9. aplikimin e nje perqendrimi perfundimtar prej 0.5 deri ne 0.8M NaCl tek pluskuesi i ndare dhe i ruajtur, i ndjekur nga trajtimi ne 4 ºC per 4 ore deri ne 1 dite; 10. heqjen e precipitatit dhe grumbullimin e pluskuesit, pas centrifugimit (12,000g, 30 min dhe 4 ºC); 11. titrimin e pluskuesit nen kushte neutrale dhe shtimin NaCL per te perftuar perqendrimin final te solucionit 1.6M NaCl; 12. trajtimin e solucionit te rezultuar ne 4 ºC per 4 ore deri ne 1 dite, ndjekur nga centrifugimi, dhe heqjen e nje precipitati serisht dhe grumbullimin e pluskuesit; 13. shtimin me tej te NaCl ne pluskuesin e grumbulluar ne nje perqendrim perfundimtar prej 2.6M NaCl, ndjekur nga mbajtja ne 4 ºC per 4 ore deri ne 1 dite; 14. centrifugimin per te hequr nje pluskues, dhe larjen e precipitatit te rezultuar nje ose dy here me 9.5% etanol, ndjekur nga rimbajtja ne uje te distiluar; 15. shtimi 1N HCl tek solucioni i rimbajtur ne nje sasi 1mL: 100mL raport per te arritur risuspension te plote, ndjekur nga titrimi ne 4ºC ne kushte neutrale; 16. mbajtjen e solucionit te tritruar keshtu ne nje temperature 30 deri ne 37 ºC per 4 ore deri ne 1 dite, ndjekur nga centrifugimi; dhe 17. risuspensionin e kolagjenit te precipituar keshtu ne nje perqendrim prej 1 deri ne 30 mg/mL ne tretes acidik te dobet ose PBS, te ndjekur nga mbajtja ne 4 ºC. |
| 2 | Nje metode per ndarjen e kolagjenit nga nje ind kafshe, duke perftuar keshtu kolagjen 5 deri ne 10 % te peshes fillestare te indit, qe perfshin 1. larjen mire te nje indi te kartilazhit te derrit te izoluar me uje te distiluar , etanol dhe aceton; 2. kthimin e indit te kartilazhit ne puder qe ka permase grimce 1 deri ne 500 mikrometra, ne menyre qe te ndahet kolagjeni nga indi i kartilazhit; 3. larjen e pudres se indit te kartilazhit me etanol dhe uje te distiluar; 4. trajtimin e indit te kartilazhit te lare keshtu per gjate gjithe nates me nje solucion guanidine-HCl (4Mguanidine-HCl, 0.05M Tris-HCl, pH 7.5); 5. larjen per gjate gjithe nates te pudres se kartilazhit te lare keshtu nje ose dy here me 0.1N HCl; 6. trajtimin e kartilazhit puder te lare keshtu per gjate gjithe nates me 0.5N HCl nderkohe qe tundet ne 10 deri 100 rpm; 7. trajtimin e pudres se kartilazhit me pepsine (10 deri ne 50:1 raport i indit: pepsine, dhe tretur ne 0.1N HCl perpara perdorimit), pas trajtimit per gjate gjithe nates; 8. perseritjen e tratjimit 2 deri ne 5 here per 3 deri ne 7 dite; 9. centrifugimin e solucionit pudror te kartilazhit te trajtuar me pepsine ne 4 ºC dhe 12,000g per 30 min, dhe me tej ndarjen dhe ruajtjen e nje pluskuesi dhe kthimin e precipitatit ne hapin 8; 10. aplikimin e nje perqendrimi final te 0.5 deri 0.8M NaCl tek pluskuesi i ndare dhe ruajtur, ndjekur nga trajtimi ne 4 ºC per 4 ore deri ne 1 dite; 11. heqjen e precipitatit dhe grumbullimin e nje pluskuesi, pas centrifugimit (12,000g, 30 min dhe 4 ºC); 12. titrimin e pluskuesit ne kushte neutrale dhe shtimin e NaCl per te perftuar nje perqendrim perfundimtar te solucionit deri ne 2.6M NaCl; 13. trajtimin e solucionit rezultues ne 4 ºC per 4 ore deri ne 1 dite, ndjekur nga centrifugimi dhe heqja e precipitatit serisht dhe grumbullimi i pluskuesit; 14. shtimi me tej i NaCl tek pluskuesi i grumbulluar ne nje perqendrim perfundimtar prej 3.5 deri 4.0M NaCl, ndjekur nga qendrimi ne 4 ºC per 4 ore deri ne 1 dite; 15. centrifugimi per te hequr nje pluskues, dhe larja e precipitatit te rezultuar nje ose dy here me 95% etanol, ndjekur nga rimbajtja ne uje te distiluar; 16. shtimi i 1N HCl tek solucioni i rimbajtur ne nje sasi 1mL: 100mL raport per te arritur rimbajtje te plote, ndjekur nga titrimi ne 4ºC ne kushte neutrale; 17. risuspensionin e kolagjenit te precipituar keshtu ne nje perqendrim prej 1 deri ne 30 mg/mL ne tretes acidik te dobet ose PBS, te ndjekur nga mbajtja ne 4 ºC. |
| 3 | Nje metode per ndarjen e kolagjenit nga nje ind kafshe, duke perftuar kollagjen si 10 deri 15% te peshes fillestare te indit, qe perfshin 1. larjen mire te nje indi te lekures se derrit te izoluar me uje te distiluar , etanol dhe aceton; 2. trajtimin e indit te lekures ne seksione qe kane trashesi 500 mikrometra deri ne 5 mm, ne menyre qe te ndahet kollagjeni nga indi i lekures; 3. vendosjen e seksionit te indit ne nje rrjete qe ka permase grile 200 deri ne 500 mikrometra dhe larjen me etanol dhe uje te distiluar; 4. trajtimin e indit te lekures se lare ne kete menyre me pepsine (10 deri 50:1 raporti ind:pepsine, dhe tretur ne 0.1N HCl perpara perdorimit); 5. perseritjen e trajtimit me pepsine 2 deri ne 3 here per 2 deri ne 3 dite; 6. centrifugimin e solucionit te indit te lekures te trajtuar me pepsine ne 4ºC dhe 12,000g per 30 min, dhe me tej ndarjen dhe ruajtjen e nje pluskuesi dhe kthimin e nje precipitati ne Hapin 5; 7. aplikimin e nje perqendrimi final prej 0.5 deri ne 0.8M NaCl ne pluskuesin e ndare dhe te ruajtur, ndjekur nga trajtimi ne 4ºC per 4 ore deri ne 1 dite; 8. heqjen e nje precipitati dhe grumbullimin e pluskuesit, pas centrifugimit (12,000g. 30 min dhe 4ºC); 9. titrimin e pluskuesit ne kushte neutrale dhe shtimin e NaCl per te bere perqendrimin perfundimtar te solucionit ne 1.6M NaCl; 10. trajtimin e solucionit rezultues ne 4ºC per 4 ore deri ne 1 dite, ndjekur nga centrifugimi, dhe heqjen e precipitatit serisht dhe grumbullimin e nje pluskuesi; 11. shtimi me tej NaCl tek pluskuesi i grumbulluar ne nje perqendrim perfundimtar prej 2.6M NaCl ndjekur nga mbajtja ne 4ºC per 4 ore deri ne 1 dite; 12. centrifugimi per te hequr nje pluskues, dhe larja e precipitatit te rezultuar nje ose dy here me 95%etanol, ndjekur nga rimbajtja ne uje te distiluar; 13. shtimi 1N HCl tek solucioni i rimbajtur ne nje sasi 1mL: 100mL raport per te arritur risuspension te plote, ndjekur nga titrimi ne 4ºC ne kushte neutrale; 14. rimbajtjen e solucionit te titruar keshtu ne nje temperature prej 30 deri ne 37 ºC per 4 ore deri ne 1 dite, ndjekur nga centrifugimi; dhe 15. risuspensionin e kollagjenit te precipituar keshtune nje perqendrim prej 1 deri ne 30 mg/mL ne nje tretes acidic te dobet ose PBS, ndjekur nga ruajtja ne 4 ºC. |
| 4 | Nje metode per ndarjen e kolagjenit nga nje ind kafshe, duke perftuar kollagjen si 10 deri 20% te peshes fillestare te indit, qe perfshin 1. larjen mire te nje indi tendine te derrit te izoluar me uje te distiluar dhe etanol, ndjekur nga ruajtja ne -20 ºC. 2. trajtimin e indit te tendines ne nje seksion qe ka trashesi 500 mikrometra deri ne 5 mm, ne menyre qe te ndahet kollagjeni nga indi i tendines/ligamentit; 3. larjen e seksionit te indit me etanol dhe uje te distiluar; 4. trajtimin e tendines/ligamentit te lare ne kete menyre me pepsin (10 deri 50:1 raporti i indit:pepsines, dhe tretur ne 0.1N HCl perpara perdorimit); 5. perseritjen e trajtimit me pepsine 2 deri ne 3 here per 2 deri ne 3 dite; 6. centrifugimin e solucionit te indit te tendines/ligamentit te trajtuar me pepsine ne 4ºC dhe 12,000g per 30 min, dhe me tej ndarjen dhe ruajtjen e pluskuesit dhe rikthimin e precipitatit ne Hapin 5; 7. aplikimin e nje perqendrimi final prej 0.5 deri ne 0.8M NaCl ne pluskuesin e ndare dhe te ruajtur, ndjekur nga trajtimi ne 4 ºC per 4 ore deri ne 1 dite; 8. heqjen e precipitatit dhe grumbullimin e pluskuesit, pas centrifugimit (12,000g, 30 min dhe 4 ºC); 9. titrimin e pluskuesit ne kushte neutrale dhe shtimin NaCl per te arritur nje perqendrim final te solucionit ne 1.6M NaCl; 10. trajtimin e solucionit rezultues ne 4 ºC per 4 ore deri ne 1 dite, ndjekur nga centrifugimi, dhe heqjen e nje precipitati serisht dhe grumbullimin e nje pluskuesi; 11. shtimin me tej te NaCl ne pluskuesin e grumbulluar ne nje perqendrim final prej 2.6M NaCl, ndjekur nga nje mbajtje ne 4 ºC per 4 ore deri ne 1 dite; 12. centrifugimin per te hequr nje pluskues, dhe larjen e precipitatit te rezultuar nje ose dy here me 95% etanol, ndjekur nga rimbajtja ne uje te distiluar; 13. shtimi 1N HCl tek solucioni i rimbajtur ne nje sasi prej 1mL: 100mL raport per te arritur risuspension te plote, ndjekur nga titrimi ne 4 ºC ne kushte neutrale; 14. mbajtjen e solucionit te trituar keshtu ne nje temperature 30 deri ne 37 ºC per 4 ore deri ne 1 dite, ndjekur nga centrifugimi; dhe 15. resuspensionin e kollagjenit te precipituar ne kete menyre ne nje perqendrim prej 1 deri ne 30 mg/mL ne nje tretes acidik te dobet ose PBS, ndjekur nga mbajtja ne 4 ºC. |
| 5 | Nje metode per pergatitjen e nje solucioni kolagjeni nga nje ind kafshe, qe perfshin, pas trajtimit final te kolagjenit: trajtimin e nje solucioni kolagjeni te pergatitur sipas secilit nga pretendimet 1 deri ne 4 qe ka nje perqendrim te paracaktuar ne kushte neutrale ne 4 ºC, ndjekur nga trajtimi gjate gjithe nates ne temperature 30 deri ne 35 ºC; perqendrimin e kolagjenit nepermjet centrifugimit; dhe tretjen e kolagjenit te perqendruar ne tretes acid i dobet i frigoriferuar ose kripe e zbutur fosfati (PBS), duke pergatitur keshtu kolagjen qe ka nje perqendrim prej 1 deri ne 5 mg/mL. |
| 6 | Nje metode per pergatitjen e matrices kolagjen, qe perfshin: injektimin e ajrit te pastruar nepermjet filtrimit ne nje solucion kolagjeni te pergatitur sipas secilit nga pretendimet 1 deri ne 5 ne nje perqendrim te pershtatshem ne 3 deri ne 5 mg/mL dhe pH per te formuar pore te paracaktuara; dhe liofilizimin e solucionit me pore te formuara per te pergatitur nje matrice ku matrica eshte bere nga solucion kolagjeni qe ka nje perqendrim kolagjeni prej 3 deri ne 5 mg/mL, dhe eshte pergatitur nepermjet injektimit te ajrit te pastruar me filtrim ne solucionin e kolagjenit ne nje pH prej 5.0 deri ne 6.0, duke formuar keshtu pore te paracaktuara, liofilizimin e solucionit te kolagjenit me pore te formuara, paketimin e liofilizatit te rezultuar nepermjet trajtimit dhe sterilizimit te tyre me gaz oksid etileni (EO) ose rrezatim me reze gama (γ) per te pergatitur nje matrice kolagjeni. |